编者按：近年来，斑马鱼Crispant技术作为基因编辑领域的重要突破，凭借其高效性、低成本和易操作性等多个优势，已成为疾病机制研究、药物筛选及功能基因组学的理想工具，预计在精准治疗中将发挥更大的潜力。

Crispant技术概述

Crispant技术依托CRISPR/Cas9技术，通过将Cas9蛋白与靶点gRNA混合后注射到斑马鱼的1细胞期，获得F0代的敲除嵌合体斑马鱼（整体敲降），为表型观察和基因功能研究提供了重要基础。

Crispant的优势

相比于传统的m啡啉介导基因敲降技术，Crispant展现出了诸多优势：

• 短研究周期：最短可在2周内观察到胚胎期表型，通常在4周内提供包括靶点效率验证的完整研究报告。
• 灵活的观察时间：Crispant技术允许在斑马鱼发育的任何时间段观察表型，极大地扩展了研究的灵活性。
• 低毒副作用：Crispant体系设计并筛选获得多个高效靶点，操作简单且副作用小，确保了研究的可靠性。
• 多基因敲降能力：Crispant可同时敲降多个基因，降低非特异性表型出现的风险，适用于复杂的基因功能研究。
• 高效的稳定品系构建：Crispant筛选的靶点可直接用于稳定敲除斑马鱼品系的构建，节省时间与费用。

应用场景

MILE米乐的Crispant技术通过多重sgRNA协同编辑和F0代表型直筛，将基因功能研究的周期缩短至传统方法的1/5，同时降低50%以上的成本。其高效性、低成本与易操作性，使其成为疾病模型构建、基因功能解析及药物筛选的理想工具：

疾病模型构建

已有研究利用Crispant技术构建了癫痫模型，通过敲除irf2bpl或cars2基因，成功模拟患者的抽搐表型，并用于抗癫痫药物的筛选，如丙戊酸的验证。此外，Crispant技术还被应用于凝血障碍模型，敲除adcyap1b基因导致了凝血因子下调，表现为自发性出血，用于抗血栓药物的评估。

基因功能解析

通过敲除kctd10基因，研究者们诱导了心脏线性畸形，进而用于心脏发育的研究；而敲除rfx6基因则诱导出类似糖尿病的表型，用于探讨胰腺功能。

药物筛选

已有研究通过敲除斑马鱼cars2、Sigirr、cbsb等基因，诱发与神经系统疾病、抗感染与免疫调节、代谢与罕见病、肿瘤个性化等相关的表型，助力药物的筛选。

结论

作为健康美丽产业CRO服务的开拓者与引领者，MILE米乐在斑马鱼生物技术领域处于全球领先地位。凭借超过10年的斑马鱼基因编辑技术经验，MILE米乐可为广泛的科研场景提供流程化、体系化、模块化的斑马鱼Crispant技术服务，满足各类需求，欢迎有需要的读者垂询！